分子筛（凝胶过滤层析）蛋白纯化系统的优缺点

那么下面上海金鹏分析仪器有限公司为大家简单介绍一下关于分子筛（凝胶过滤层析）蛋白纯化系统的优缺点：
 
分子筛定义：
 
分子筛层析，又称为凝胶过滤层析或体积排阻层析。分子筛层析是利用有一定孔径范围的多孔凝胶作为固定相，对混合物中各组分按分子大小进行分离的层析技术。具有分子筛作用的物质很多，如浮石、琼脂、琼脂糖、聚乙烯醇、聚丙烯酰胺、葡聚糖凝胶等。
 
避开原因一：工艺放大困难
分子筛层析无法遵循线性放大原则，即使遵循柱床高度不变的原则，工艺流速如何进行调整，也是需要面临的问题。为保证良好的分离效果，分子筛层析需要求相对较高的装填高度，然而装填高度偏高，反压也势必会偏高。由于层析填料的耐压有限，在保证不超压的前提下，工艺流速会明显受限，这会使得整个纯化过程时间漫长。
 
避开原因二：层析柱装填困难
在进行层析柱装填时，匀浆液浓度需要在一定的范围内（50%-70%），方可保证沉降均匀、柱效良好，这对层析柱的规格选型有着特殊要求。高度100 cm的层析柱，在匀浆浓度50%-70%时，假设压缩系数为1.15，则实际使用高度为43.5-60.9 cm，这往往无法达到某些使用者的要求。若选配装柱器，并考虑柱头所占空间，这要求实验空间需高度充足。若考虑将2根层析柱串联使用，则要求2根层析柱的柱效相当，才可保证分离效果良好，这对装填技术也有着较高要求。
 
避开原因三：测定柱效困难
常规柱效测定方法，要求平衡1.5-2 CV，进样后，洗脱至出峰（参考值：2 CV），流速30 cm/h。若假设装填高度为60 cm，平衡、洗脱体积总计3.5 CV，经计算，测定一次柱效，需耗时7小时。可以想象，当发现柱效不理想，需要重新装填并测定柱效时，过程是很繁琐、耗时的。
 
避开原因四：维护保养操作困难
当层析柱使用完毕，用20%乙醇保存时，同样也很耗时。而且当再次使用时，用水将20%乙醇置换走，一般需要3 CV以上，而且由于该过程反压较大，通常还需要降低流速进行。
 
总之，采用分子筛层析，各个环节都很繁琐、耗时，因此，在进行层析工艺设计时，要尽量避开分子筛层析。
 
以上就是上海金鹏分析仪器有限公司为大家整理总结关于分子筛（凝胶过滤层析）蛋白纯化系统的优缺点。
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